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微生物如何看平板菌落

發布時間:2022-04-14 10:47:55

微生物檢驗中飲料的大腸菌群平板計數法具體操作步驟是怎樣的

兩個平板總共挑選10個典型菌落或者是可疑菌落(是五五分還是四六分這個全憑你心情了),有的菌落長的在10個以下的就有幾個接種幾管就OK了。
每次接種前將典型和可疑菌落分類,哪個多就多接種幾管,少的就少接種幾管,每個樣品只需選15-150菌落間的稀釋度接種BGLB管。
接種的目的是看是否產氣且是否有大腸。

② 要使平板菌落計數准確,需要掌握哪幾個關鍵為什麼

1、無菌操作。

2、稀釋良好,不會太濃或太稀。

3、菌落生長時間控制好,不會長的太大不便區分,也不至於太小影響計數。

首先將待測樣品作一系列稀釋,稀釋度的選擇很重要,以三個稀釋度中的第二稀釋度倒平板所出現的平均菌落數在50個左右為最好。

再取一定量的稀釋菌液接種到培養皿中,使其均勻分布於平皿中的培養培養後,由單個細胞生長繁殖形成菌落,統計菌落數目,即可換算出樣品中的含培養後,由單個細胞生長繁殖形成菌落,統計菌落數目,即可換算出樣品中的含菌數。



(2)微生物如何看平板菌落擴展閱讀

檢測食品中微生物數量,一般採用標准平板菌落計數法(SPC)對食品中的活的微生物進行菌落形成單位(CFU)數量的檢測。

即將部分樣品取出混合均勻,用適當的稀釋液進行梯度稀釋,取一定量的稀釋液塗布或傾注瓊脂平板,在合適的溫度下培養一定的時間,然後通過肉眼觀察或電子計數器對所有可見菌落進行計數。

雖然日常檢測大多採用傾注平板的方法,但是塗布法在檢測熱敏性菌體方面更有優勢,能取得更好的計數結果,而且更適合於嚴格好氧菌。塗布法的缺點是塗布時瓊脂表面不幹燥和培養後菌落蔓延導致無法計數。

使用注意事項

儀器要放在平整牢固的試驗台上,點數時,探筆不要過於傾斜,輕點至有彈跳感,數字即可顯示。儀器應防塵,放大鏡表面的灰塵,要用純化水清洗後,再用鏡頭紙擦拭乾凈即可,另外還應防潮、防劇烈震動、防日光曝曬、防酸鹼等,使用完後加防護罩。儀器及探筆非專業人員不能拆卸,有故障,請專業技術人員檢修。

③ 如何從平板菌落的形態,與基質結合的緊密程度等來區分細菌

菌落(colony)是由單個細菌(或其他微生物)細胞或一堆同種細胞在適宜固體培養基表面或內部生長繁殖到一定程度,形成肉眼可見的子細胞群落。菌落特徵與微生物的菌體形態結構特徵密切相關。
應該注意菌落的特徵有:大小、形狀、顏色、表面是否濕潤、周圍培養基的改變、氣味、性狀等等。

④ 平板菌落計數的原理是什麼它適用於哪些微生物的計數

原理:
將待測樣品經適當稀釋之後,其中的微生物充分分散成單個細胞,取一定量的稀釋樣液塗布到平板上,經過培養,由每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落,即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞;統計菌落數,根據其稀釋倍數和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數。
適用於:

通常用來測定樣品中所含細菌、孢子、酵母菌等單細胞微生物的數量。

⑤ 食品微生物檢驗中的平板菌落數的選擇,選取菌落數在15到150之間,應怎麼做呢

(1)首先,我們寫報告選取的菌落數在30~300CFU,03版的和2010版的國標都是這么規定的,我不知道你們為什麼選15到150。其次,出現的典型和可疑大腸菌群菌落數是指一個稀釋級別的兩塊平板的菌落數的平均數。舉例:如果有一個超過了150,而一個沒有超過,有兩種可能,第一,你的實驗中受到了污染,或者說加樣品稀釋液的量少了。解決方法,實驗前要確保實驗的整個流程都是無菌的,實驗的環境是否紫外消毒,通風情況,樣品打開前是否對包裝進行75%酒精消毒,是否點酒精燈,實驗穿的白大衣是否經紫外照射,實驗時是否帶口罩,腳套,頭套;加稀釋液的時候應 用槍(微量移液器)加樣。第二說明你選的這個范圍無法彌補實驗中產生的誤差,簡單的說你可以選30~300CFU進行報告。
(2)指的是一個稀釋級別的2個平板共移種10管,每個板子5管。至於你說的3個稀釋級別問題,你可以想一下,加入第一個稀釋級別是150cfu,第二個就應該在15cfu左右,第三個就該是1~2cfu左右,不在15~150cfu之間啊,你沒必要報告它呀,只需報前兩個稀釋度的。所以,一般做實驗只用作兩個稀釋度的就行了。

⑥ 微生物平板菌落計數法具體實驗步驟

一、目的要求

學習平板菌落計數的基本原理和方法。

二、基本原理

平板菌落計數法是根據微生物在固體培養基上所形成的一個菌落是由一個單細胞繁殖而成的現象進行的,也就是說一個菌落即代表一個單細胞。計數時,先將待測樣品作一系列稀釋,再取一定量的稀釋菌液接種到培養皿中,使其均勻分布於平皿中的培養基內,經培養後,由單個細胞生長繁殖形成菌落,統計菌落數目,即可換算出樣品中的含菌數。

這種計數法的優點是能測出樣品中的活菌數。此法常用於某些成品檢定(如殺蟲菌劑),生物製品檢定以及食品、水源的污染程度的檢定等。但平板菌落計數法的手續較繁,而且測定值常受各種因素的影響。

三、器材

大腸桿菌懸液,牛肉膏蛋白腖培養基, 1ml無菌吸管,無菌平皿,盛有4. 5 ml無菌水的試管,試管架和記號筆等。

四、操作步驟

1.編號:

取無菌平皿 9套,分別用記號筆標明10-4、10-5、10-6各3套。另取6支盛有4.5ml無菌水的試管,排列於試管架上,依次標明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。

2.稀釋

用1ml無菌吸管精確地吸取0.5ml大腸桿菌懸液放入10-1的試管中,注意吸管尖端不要碰到液面,以免吹出時,管內液體外溢。然後仍用此吸管將管內懸液來回吸吹三次,吸時伸入管底,吹時離開水面,使其混合均勻。另取一支吸管自10-1試管吸0.5ml放入10-2試管中,吸吹三次,……其餘依次類推。整個稀釋過程如圖Ⅷ-3。

3.取樣

用3支1ml無菌吸管分別精確地吸取10-4、10-5、10-6的稀釋菌液0.2ml,對號放入編好號的無菌培養皿中。

4.倒平板

於上述盛有不同稀釋度菌液的培養皿中,倒入溶化後冷卻至45℃左右的肉膏蛋白腖瓊脂培養基約10—15ml,置水平位置,迅速旋動混勻,待凝固後,倒置於37℃溫室中培養。

5.計數

培養24小時後,取出培養皿,算出同一稀釋度三個平皿上的菌落平均數,並按下列公式進行計算:

每毫升中總活菌數=同一稀釋度三次重復的菌落平均數×稀釋倍數×5

一般選擇每個平板上長有30—300個菌落的稀釋度計算每毫升的菌數最為合適。同一稀釋度的三個重復的菌數不能相差很懸殊。由10-4、10-5、10-6三個稀釋度計算出的每毫升菌液中總活菌數也不能相差懸殊,如相差較大,表示試驗不精確。

平板菌落計數法,所選擇倒平板的稀釋度是很重要的,一般以三個稀釋度中的第二稀釋度倒平板所出現的平均菌落數在50個左右為最好。

平板菌蓓計數法的操作除上述的以外,還可用塗布平板的方法進行。二者操作基本相同,所不同的是塗布平板法是先將牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基溶化後倒平板,待凝固後編號,並於 37℃溫室中烘烤30分鍾左右,使其乾燥,然後用無菌吸管吸取 0.2ml菌液對號接種於不同稀釋度編號的培養皿中的培養基上,再用無菌玻璃刮棒將菌液在平板上塗布均勻,平放於實驗台上20—30分鍾,使菌液滲透入培養基內,然後再倒置於37℃的溫室中培養。

五、實驗報告

1.結果

將計數結果填入下表。

2.思考題

(1)為什麼溶化後的培養基要冷卻至45℃左右才能倒平板?

(2)要使平板菌落計數准確,需要掌握哪幾個關鍵?為什麼?

(3)同一種菌液用血球計數板和平板菌落計數法同時計數,所得結果是否一樣?為什麼?

(4)試比較平板菌落計數法和顯微鏡下直接計數法的優缺點。

⑦ 我是新手,想問一下微生物檢驗菌落總數測定具體操作步驟

O(∩_∩)O~我的那本微生物的書上有,但是太多了。我就偷懶一下,那個你先看看,若不行,我再翻書~~~
7操作步驟
7.1檢樣稀釋及培養
7.1.1以無菌操作,取樣25mL或25 g放入225mL滅菌生理鹽水中,經充分振搖作成1:10均勻稀釋液。

固體檢樣在加入稀釋液後,最好置均質器中以8000r/min~10000r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液。

7.1.2用1mL滅菌吸管吸取1∶10稀釋液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(注意吸管尖端不要觸及管內稀釋液),振搖試管,混合均勻,做成1∶100的稀釋液。
7.1.3另取1mL滅菌吸管,按上條操作順序,做10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次,即換用1支1mL火菌吸管。
7.1.4根據食品衛生標准要求或對標本污染情況的估計,選擇2~3個適宜稀釋度,分別在做10倍遞增稀釋的同時,即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液於滅菌平皿內,每個稀釋度做兩個平皿。
7.1.5稀釋液移入平皿後,應及時將涼至46℃營養瓊脂培養基(可放置於46±1℃水浴保溫)注入平皿約15mL,並轉動平皿使混合均勻。同時將營養瓊脂培養基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內作空白對照

7.1.6待瓊脂凝固後,翻轉平板,置36±1℃溫箱內培養48±2h。
7.2菌落計數方法
做平板菌落計數時,可用肉眼觀查,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平板的菌落數後,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數。
7.3菌落計數的報告
7.3.1平板菌落數的選擇
選取菌落數在30~300之間的平板作為菌落總數測定標准。一個稀釋度使用兩個平板,應採用兩個平板平均數,其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜採用,而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數,若片狀菌落不到平板的一半,而其餘一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板後乘2以代表全皿菌落數。平皿內如有鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線),若僅有一條鏈,可視為一個菌落;如果有不同來源的幾條鏈,則應將每條鏈作為一個菌落計。
7.3.2稀釋度的選擇
7.3.2.1應選擇平均菌落數在30~300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數報告之(見表1中例1)。
7.3.2.2若有兩個稀釋度,其生長的菌落數均在30~300之間,則視兩者之比如何來決定。若其比值小於或等於2,應報告其平均數;若大於2則報告其中較小的數字(見表中例2及3)。
7.3.2.3若所有稀釋度的平均菌落數均大於300,則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表1中例4)。
7.3.2.4若所有稀釋度的平均菌落數均小於30,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表1中例5)。
7.3.2.5若所有稀釋度均無菌落生長,則以小於1乘以最低稀釋倍數報告之(見表1中例6)。
7.3.2.6若所有稀釋度的平均菌落數均不在30~300之間,其中一部分大於300或小於30時,則以最接近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之

⑧ 微生物實驗中ss平板培養的結果分析

SS平板用途: 用於沙門氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養
腖、牛肉膏粉提供碳源、氮源、維生素和礦物質;乳糖、葡萄糖為可發酵的糖類;三號膽鹽、檸檬酸鈉和煌綠抑製革蘭氏陽性菌及大多數的大腸菌群和變形桿菌,但不影響沙門氏菌的生長;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用於檢測硫化氫的產生,使菌落中心呈黑色;中性紅為pH指示劑,發酵糖產酸的菌落呈紅色,不發酵糖的菌落為無色。
根據平板顏色確定菌落。

⑨ 怎樣用平板菌落計數法測定微生物活菌數

1.先將微生物製成菌懸液
2.梯度稀釋
3.塗平板
4.培養,計算菌落數,然後算出菌懸液單位體積的活菌數

⑩ 微生物平板培養,怎樣識別單菌落及如何描述

如果你接種的足夠稀釋的話(這個純粹憑經驗了),一個菌落就是單菌落。
描述內容:菌落大小,顏色,形狀(邊緣是否規則,中心是否凹凸),粘稠或者乾燥,與培養基結合是否緊密,是否有可見孢子粉,氣味。

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