生物化學工具酶有哪些

㈠ 用於植物基因克隆的工具酶有哪些

分子克隆中常用的工具酶連接酶、T4 多核苷酸激酶、鹼性磷酸酶、核酸酶、瓊脂糖酶、蛋白酶、溶菌酶以及一些DNA 結合蛋白。
分子克隆在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用體外重組方法將它們插入克隆載體，形成重組克隆載體，通過轉化與轉導的方式，引入適合的寄主體內得到復制與擴增，然後再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體，可以得到插入DNA的許多拷貝，從而獲得目的基因的擴增。
工具酶：基因工程涉及眾多的工具酶可粗略的分為限制酶，連接酶，聚合酶，核酸酶和修飾酶五大類。其中，以限制性核酸內切酶和DNA連接酶在分子克隆中的作用最為突出。

㈡ 急！生物化學！常見水解澱粉的酶有哪些各自的產物是什麼

化學中的條件是酸性條件下的水解， 得到的是最終產物——葡萄糖生物里的條件是澱粉酶（不同生物體具體名稱不同），分解成二糖——麥芽糖， 而麥芽糖分解成葡萄糖需要的是麥芽糖酶

㈢ 基因表達載體的構建需要哪些工具酶

在構建基因表達載體時要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。
基因表達載體的構建（即目的基因與運載體結合）是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其構建目的是使目的基因能在受體細胞中穩定存在，並且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發揮作用。
過程：
首先要用一定的限制酶切割質粒，使質粒出現一個缺口，露出黏性末端。然後用同
一種限制酶切斷目的基因，使其產生相同的黏性末端（部分限制性內切酶可切割出平末端，擁有相同效果）。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處，首先鹼基互補配對結合，兩個黏性末端吻合在一起，鹼基之間形成氫鍵，再加入適量DNA連接酶，催化兩條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脫氧核糖核酸連接起來，形成一個重組DNA分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸桿菌中的質粒DNA分子結合，形成重組DNA分子（也叫重組質粒）的。

㈣ 1.2.基因工程常用的工具酶和載體有哪些

1. 酶：

   DNA連接酶，

   DNA聚合酶（PCR中使用，eg. Taq, Q5, S15......）

   限制性內切酶(BamH1, Sau3AI, 大概上百種，根據識別酶切位點的序列而定)，

   CIP(鹼性磷酸酶，去磷酸化，防止質粒自連)

2. 載體：

   對於細菌來說（質粒）： 復制載體： pUC18, pUC19.....對應使用的宿主如 Top10

   表達載體：pACYC, pET 系列的質粒，對應表達宿主如BL21

   對於動物和植物來說也可以用質粒來做載體，但轉化方法不太一樣，比如植物需要農桿菌轉化法細菌用熱激或電轉。

㈤ 基因工程中有哪些常用的工具酶，他們各自的主要作用是什麼

基因工程中主要的工具酶有限制酶和dna連接酶。
限制酶的作用是切割目的基因兩端，而dna連接酶是將目的基因和運輸體的黏性末端連接在一起。

㈥ 基因工程中有哪些常用的工具酶，他們各自的主要作用是什麼

基因工程中常用的工具酶有：限制酶、聚合酶、連接酶、修飾酶和核酸酶五大類，各自的主要作用如下：

1、限制酶：

可以識別並附著特定的脫氧核苷酸序列，並對每條鏈中特定部位的兩個脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割。

2、聚合酶：

可以專門生物催化合成脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的一類酶。

3、連接酶：

作用是催化兩種大型分子以一種新的化學鍵結合一起的酶，一般會涉及水解其中一個分子的團。

4、修飾酶：

能催化稀有鹼基參入RNA或DNA，或對原有鹼基進行修飾的酶。以防止限制性內切酶的破壞。

體內有些酶可在其他酶的作用下，將酶的結構進行共價修飾，而使其在高活性形式和相對較低的活性形式之間互相轉變，這種調節稱為共價修飾調節。

5、核酸酶：

是能夠將聚核苷酸鏈的磷酸二酯鍵切斷的酶，核酸酶屬於水解酶，作用於磷酸二酯鍵的P-O 位置，核酸酶是在核酸分解的第一步中，作用於水解核苷酸之間的磷酸二酯鍵的一種核酸。在高等動植物中都有作用於磷酸二酯鍵的。

㈦ 酶的分類有哪些

一、酶的分類
與DNA復制有關的酶
解旋酶、DNA聚合酶

與DNA轉錄有關的酶
解旋酶、RNA聚合酶

與蛋白質翻譯有關的酶
蛋白質合成酶

與逆轉錄有關的酶
反轉錄酶、DNA聚合酶

與基因工程有關的酶
限制性核酸內切酶、DNA連接酶

植物細胞工程有關的酶
纖維素酶、果膠酶

動物細胞工程有關的酶
胰蛋白酶

物質代謝酶
消化酶（存在於消化管內）：澱粉酶（唾液、胰液）、麥芽糖酶（胰液、小腸液）、脂肪酶（胰液）、蛋白酶（胃液、胰液）、肽酶（腸液）

水解酶類：脂肪酶、蛋白酶、肽酶、轉氨酶

呼吸酶（有氧及無氧呼吸酶）

光合作用酶

ATP合成酶及ATP水解酶

微生物代謝酶類
組成酶類：只受遺傳物質控制

誘導酶類：受遺傳物質控制的同時，還受環境的影響

二、主要酶的功能概述

1．解旋酶：作用於氫鍵，是一類解開氫鍵的酶，由水解ATP來供給能量它們常常依賴於單鏈的存在，並能識別復制叉的單鏈結構。在細菌中類似的解旋酶很多，都具有ATP酶的活性。大部分的移動方向是5′→3′，但也有3′→5′移到的情況，如n′蛋白在φχ174以正鏈為模板合成復制形的過程中，就是按3′→5′移動。在DNA復制中起作用。

2．DNA聚合酶：在DNA復制中起作用，是以一條單鏈DNA為模板，將單個脫氧核苷酸通過磷酸二酯鍵形成一條與模板鏈互補的DNA鏈，形成鏈與母鏈構成一個DNA分子。

3．DNA連接酶：其功能是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。如果將經過同一種內切酶剪切而成的兩段DNA比喻為斷成兩截的梯子，那麼，DNA連接酶可以把梯子的「扶手」的斷口處（注意：不是連接鹼基對，鹼基對可以依靠氫鍵連接），即兩條DNA黏性末端之間的縫隙「縫合」起來。據此，可在基因工程中用以連接目的基因和運載體。
與DNA聚合酶的不同在於：不在單個脫氧核苷酸與DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，而是將DNA雙鏈上的兩個缺口同時連接起來，因此DNA連接酶不需要模板

4．RNA聚合酶：又稱RNA復制酶、RNA合成酶，作用是以完整的雙鏈DNA為模板，邊解放邊轉錄形成mRNA，轉錄後DNA仍然保持雙鏈結構。對真核生物而言，RNA聚合酶包括三種：RNA聚合酶I轉錄rRNA，RNA聚合酶Ⅱ轉錄mRNA，RNA聚合酶Ⅲ轉錄tRNA和其她小分子RNA。在RNA復制和轉錄中起作用。

5．反轉錄酶：為RNA指導的DNA聚合酶，催化以RNA為模板、以脫氧核糖核苷酸為原料合成DNA的過程。具有三種酶活性，即RNA指導的DNA聚合酶，RNA酶，DNA指導的DNA聚合酶。在分子生物學技術中，作為重要的工具酶被廣泛用於建立基因文庫、獲得目的基因等工作。在基因工程中起作用。

6．限制性核酸內切酶（簡稱限制酶）：限制酶主要存在於微生物（細菌、黴菌等）中。一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，並且能在特定的切點上切割DNA分子。是特異性地切斷DNA鏈中磷酸二酯鍵的核酸酶（「分子手術刀」）。發現於原核生物體內，現已分離出100多種，幾乎所有的原核生物都含有這種酶。是重組DNA技術和基因診斷中重要的一類工具酶。例如，從大腸桿菌中發現的一種限制酶只能識別GAATTC序列，並在G和A之間將這段序列切開。目前已經發現了200多種限制酶，它們的切點各不相同。蘇雲金芽孢桿菌中的抗蟲基因，就能被某種限制酶切割下來。在基因工程中起作用。

7．纖維素酶和果膠酶：植物細胞工程中植物體細胞雜交時，需事先用纖維素酶和果膠酶分解植物細胞的細胞壁，從而獲得有活力的原生質體，然後誘導不同植物的原生質體融合。

8．胰蛋白酶：在動物細胞工程的動物細胞培養中，需要用胰蛋白酶將取自動物胚胎或幼齡動物的器官和組織分散成單個的細胞，然後配製成細胞懸浮液進行培養。或用於細胞傳代培養時將細胞從瓶壁上消化下來。

9．澱粉酶：主要有唾液腺分泌的唾液澱粉酶、胰腺分泌的胰澱粉酶和腸腺分泌的腸澱粉酶，可催化澱粉水解成麥芽糖。

10．麥芽糖酶：主要有胰腺分泌的胰麥芽糖酶和腸腺分泌的腸麥芽糖酶，可催化麥芽糖水解成葡萄糖。

11．脂肪酶：主要有胰腺分泌的胰脂肪酶和腸腺分泌的腸脂肪酶，可催化脂肪分解為脂肪酸和甘油。肝臟分泌的膽汁乳化脂肪形成脂肪微粒後，有利於脂肪分解。

12．蛋白酶：主要有胃腺分泌的胃蛋白酶和胰腺分泌的胰蛋白酶，可催化蛋白質水解成多肽鏈。作用結果是破壞肽鍵和蛋白質的空間結構。

13．肽酶：由腸腺分泌，可催化多肽鏈水解成氨基酸。

14．轉氨酶：催化蛋白質代謝過程中氨基轉換過程。如人體的谷丙轉氨酶（GPT），能夠把谷氨酸上的氨基轉移給丙酮酸，從而形成丙氨酸和a—酮戊二酸。
由於谷丙轉氨酶在肝臟中的含量最多，當肝臟病變時谷丙轉氨酶就大量釋放到血液，因此臨床上常把化驗人體血液中這種酶的含量作為診斷是否患肝炎等疾病的一項重要指標。

15．光合作用酶：是指與光合作用有關的一系列酶，主要存在於葉綠體中。

16．呼吸氧化酶：與細胞呼吸有關的一系列酶，主要存在於細胞質基質和線粒體中。

17．ATP合成酶：指催化ADP和磷酸，利用能量形成ATP的酶。

18．ATP水解酶：指催化ATP水解形成ADP和磷酸，釋放能量的酶。

19．組成酶：指微生物細胞中一直存在的酶。它們的合成只受遺傳物質的控制，如大腸桿菌細胞中分解葡萄糖的酶。

20．誘導酶：指環境中存在某種物質的情況下才合成的酶，如大腸桿菌細胞中分解乳糖的酶。

㈧ 基因表達載體的構建需要哪些工具酶

限制性核酸內切酶或限制酶——比作剪刀 DNA連接酶——比作針線（包括T4DNA連接酶 熱穩定DNA連接酶等） 樓上的說的不對

這還有幾種酶的比較 有興趣就看看 希望採納


限制性核酸內切酶（以下簡稱限制酶）：限制酶主要存在於微生物（細菌、黴菌等）中。一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，並且能在特定的切點上切割DNA分子。是特異性地切斷DNA鏈中磷酸二酯鍵的核酸酶（「分子手術刀」）。發現於原核生物體內，現已分離出100多種，幾乎所有的原核生物都含有這種酶。是重組DNA技術和基因診斷中重要的一類工具酶。例如，從大腸桿菌中發現的一種限制酶只能識別GAATTC序列，並在G和A之間將這段序列切開。目前已經發現了200多種限制酶，它們的切點各不相同。蘇雲金芽孢桿菌中的抗蟲基因，就能被某種限制酶切割下來。在基因工程中起作用。 DNA連接酶：主要是連接DNA片段之間的磷酸二酯鍵，起連接作用，在基因工程中起作用。 DNA聚合酶：主要是連接DNA片段與單個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，在DNA復制中起做用。 DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羥基上，形成磷酸二酯鍵；而DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，不是在單個核苷酸與DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。 DNA聚合酶是以一條DNA鏈為模板，將單個核苷酸通過磷酸二酯鍵形成一條與模板鏈互補的DNA鏈；而DNA連接酶是將DNA雙鏈上的兩個缺口同時連接起來。因此DNA連接酶不需要模板。 DNA連接
RNA聚合酶（又稱RNA復制酶、RNA合成酶）的催化活性：RNA聚合酶以完整的雙鏈DNA為模板，轉錄時DNA的雙鏈結構部分解開，轉錄後DNA仍然保持雙鏈的結構。真核生物RNA聚合酶：真核生物的轉錄機制要復雜得多，有三種細胞核內的RNA聚合酶：RNA聚合酶I轉錄rRNA，RNA聚合酶II轉錄mRNA，RNA聚合酶III轉錄tRNA和其它小分子RNA。在RNA復制和轉錄中起作用。 反轉錄酶：RNA指導的DNA聚合酶，具有三種酶活性，即RNA指導的DNA聚合酶，RNA酶，DNA指導的DNA聚合酶。在分子生物學技術中，作為重要的工具酶被廣泛用於建立基因文庫、獲得目的基因等工作。在基因工程中起作用。 解旋酶：是一類解開氫鍵的酶，由水解ATP來供給能量它們常常依賴於單鏈的存在，並能識別復制叉的單鏈結構。在細菌中類似的解旋酶很多，都具有ATP酶的活性。大部分的移動方向是5'→3'，但也有3'→5'移到的情況，如n'蛋白在φχ174以正鏈為模板合成復制形的過程中，就是按3'→5'移動。在DNA復制中起做用。 DNA限制酶作用於磷酸二酯鍵 DNA連接酶作用於磷酸二酯鍵 DNA聚合酶作用於磷酸二酯鍵 DNA解旋酶作用於氫鍵

㈨ 生物化學反應中充當氧化還原反應的輔酶或輔基都有哪些

一、名詞解釋
1．酶 13．最適pH
2．固定化酶 14．不可逆性抑制
3．同工酶 15．可逆性抑制
4．酶的特異性 16．激活劑
5．酶的活性中心 17．抑制劑
6．酶原及酶原激活 18．核酶
7．抗體酶 19．變構酶
8．活化能 20．酶的共價修飾
9．誘導契合假說 21．酶的Vmax
10．初速度 22．結合酶
11．Km值 23．酶活力
12．最適溫度 24．比活力
二、填空題
25．酶是由 產生的對特異底物起高效催化作用的 。
26．酶加速反應的機制是通過降低反應的 ，而不改變反應的 。
27．結合酶，其蛋白質部分稱 ，非蛋白質部分稱 ，二者結合其復合物稱 。
28．酶活性中心與底物相結合那些基團稱 ，而起催化作用的那些基團稱 。
29．當Km值近似 ES的解離常數KS時，Km值可用來表示酶對底物的 。
30．酶的特異性包括 特異性， 特異性和 特異性。
31．米曼二氏根據中間產物學說推導出V與[S]的數學方程式簡稱為 ，式中的 ..為米氏常數，它的值等於酶促反應速度達到 一半時的 。
32．在其它因素不變的情況下，[S]對酶促反應V作圖呈 線，雙倒數作圖呈 線，而變構酶的動力學曲線呈 型。
33．可逆性抑制是指抑制劑與酶進行 結合影響酶的反應速度， 抑制劑與酶的活性中心結合， 抑制劑與酶的活性中心外的必需基團結合。
34．反競爭性抑制劑使酶對底物表觀Km ，Vmax 。
35．無活性狀態的酶的前身物稱為 ，在一定條件下轉變成有活性酶的過程稱 。其實質是 的形成和暴露過程。
36．丙二酸是 酶的 抑制劑，增加底物濃度可 抑制。
37、同工酶是指催化化學反應 ，而酶蛋白分子結構、理化性質及免疫學性質 的一組酶。
38．輔酶與輔基的區別在於前者與酶蛋白 ，後者與酶蛋白 。
39．肌酸激酶的亞基分 型和 型。
40．最適溫度 酶的特徵性常數，它與反應時間有關，當反應時間延長時，最適溫度可以 。
41．某些酶以 形式分泌，不僅可保護 本身不受酶的水解破壞，而且可輸送到特定的部位與環境轉變成 發揮其催化作用。

㈩ 用於酶切的常用工具酶有哪些

1,限制內切酶：用於DNA分子的特異切割
2，DNA甲基化酶：用於DNA分子的甲基化
3，核酸酶：用於DNA、RNA的非特異性切割
4，核酸聚合酶：合成
5，核酸連接酶：連接
6，核酸末端修飾酶：末端修飾
7，其他酶：破壁