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常用的化學染色有哪些

發布時間:2022-08-21 19:23:30

1. 細菌常見的幾種染色方法

細菌常用的染色方法:革蘭氏染色(最基本)、芽孢染色、莢膜染色、鞭毛染色等。

2. 常用的細胞染色方法有哪些

常用的細胞染色方法有:

1、簡單染色法,常用鹼性染料如美藍等進行簡單染色;

2、革蘭氏染色法,主要包括結晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復染四個過程;

3、瑞氏染色法,瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍組成;

4、吉姆薩染色法,吉姆薩染色原理與結果和瑞特染色法基本相同;

5、細胞免疫熒光染色法,免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結合。

染色是生物顯微玻片標本製作中最重要的環節之一。先把破壞細胞膜的選擇透過性,再使用染色劑,將生物組織浸入染色劑內,使組織細胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色,產生不同的折射率,以便觀察。

另外,銀染法也較常用。當組織塊浸入硝酸銀溶液中時,有的組織結構能直接把硝酸銀還原,使銀粒附於其上,呈棕黑色或棕黃色。有些結構本身對硝酸銀無直接還原能力,若加入還原劑,可使硝酸銀還原沉澱顯色。


(2)常用的化學染色有哪些擴展閱讀:

染色細胞固定有物理法與化學法,物理法為乾燥和火焰固定,化學法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。

1、偶氮偶聯法:利用人工合成的酶底物,在酶作用下,產生分解產物,再與重氮鹽結合引起偶氮偶聯,使其形成不溶性的偶氮色素,以此證明酶的存在。

2、聯苯胺法:粒細胞和單核細胞中的過氧化物酶作用於過氧化氫,釋放新生態氧,使無色的聯苯胺形成藍色沉澱。

3、普魯士藍法:細胞內、外鐵與酸性亞鐵氰化鉀作用,形成藍色亞鐵氰化鐵沉澱。

4、雪夫反應:過碘酸氧化細胞內糖類中乙二醇基形成乙醛基,醛基與雪夫試劑作用,使無色品紅形成紅色沉澱。

5、金屬沉著法:其他尚有物理學方法,如脂溶性染料染色(顯示脂質)、熒光顯示、放射自顯影以及體外活體染色亦常用於臨床血液細胞學診斷。

3. 醫學上的染色法,除了革蘭氏染色和瑞氏染色外,還有哪些

染色方法

微生物染色方法一般分為單染色法和復染色法兩種。前者用一種染料使微生物染色,但不能鑒別微生物。復染色法是用兩種或兩種以上染料,有協助鑒別微生物的作用。故亦稱鑒別染色法。常用的復染色法有革蘭氏染色法和抗酸性染色法,此外還有鑒別細胞各部分結構的(如芽胞、鞭毛、細胞核等)特殊染色法。食品微生物檢驗中常用的是單染色法和革蘭氏染色法。

1、單染色法

用一種染色劑對塗片進行染色,簡便易行,適於進行微生物的形態觀察。在一般情況下,細菌菌體多帶負電荷,易於和帶正電荷的鹼性染料結合而被染色。因此,常用鹼性染料進行單染色,如美蘭、孔雀綠、鹼性復紅、結晶紫和中性紅等。若使用酸性染料,多用剛果紅、伊紅、藻紅和酸性品紅等。使用酸性染料時,必須降低染液的PH值,使其呈現強酸性(低於細菌菌體等電點),讓菌體帶正電荷,才易於被酸性染料染色。

單染色一般要經過塗片、固定、染色、水洗和乾燥五個步驟。

染色結果依染料不同而不同:

石碳酸復紅染色液:著色快,時間短,菌體呈紅色。
美蘭染色液:著色慢,時間長,效果清晰,菌體呈蘭色。

草酸銨結晶染色液:染色迅速,著色深,菌體呈紫色。

2、革蘭氏染色法

革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫師Gram創立。

細菌先經鹼性染料結晶染色,而經碘液媒染後,用酒精脫色,在一定條件下有的細菌此色不被脫去,有的可被脫去,因此可把細菌分為兩大類,前者叫做革蘭氏陽性菌(G+),後者為革蘭氏陰性菌(G—)。為觀察方便,脫色後再用一種紅色染料如鹼性蕃紅等進行復染。陽性菌仍帶紫色,陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數和球菌,以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應;弧菌,螺旋體和大多數致病性的無芽胞桿菌都呈現負反應。

革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在化學組成和生理性質上有很多差別,染色反應不一樣。現在一般認為革蘭氏陽性菌體內含有特殊的核蛋白質鎂鹽與多糖的復合物,它與碘和結晶紫的復合物結合很牢,不易脫色,陰性菌復合物結合程度底,吸附染料差,易脫色,這是染色反應的主要依據。

另外,陽性菌菌體等電點較陰性菌為低,在相同PH條件下進行染色,陽性菌吸附鹼性染料很多,因此不易脫去,陰性菌則相反。所以染色時的條件要嚴格控制。例如,在強鹼的條件下進行染色,兩類菌吸附鹼性染料都多,都可呈正反應;PH很低時,則可都呈負反應。此外,兩類菌的細胞壁等對結晶紫—碘復合物的通透性也不一致,陽性菌透性小,故不易被脫色,陰性菌透性大,易脫色。所以脫色時間,脫色方法也應嚴格控制。本文來自檢驗地帶網

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:

1)塗片固定。

2)草酸銨結晶紫染1分鍾。

3)自來水沖洗。

4)加碘液覆蓋塗面染1分鍾。

5)水洗,用吸水紙吸去水分。

6)加95%酒精數滴,並輕輕搖動進行脫色,30秒後水洗,吸去水分。

7)蕃紅梁色液(稀)染10秒鍾後,自來水沖洗。乾燥,鏡檢。

染色的結果,革蘭氏正反應菌體都呈紫色,負反應菌體都呈紅色。

4. 常用免疫組織化學染色方法有哪些

常用免疫組織化學染色方法, LSAB法。(SP法)(Labelled streptavidim biotln) 1.切片脫蠟至水。 2.0.3%H2O2甲醇處理切片10-20分鍾。 3.水洗。 4.抗原修復。 5.PBS洗3次,1分鍾/次。 6.加入血清孵育10分鍾。 7.摔去血清,加入一抗孵育30-60分鍾。 8.PBS洗3次,每次2分鍾。加入二抗,孵育20分鍾。 9.PBS洗3次,每次2分鍾。 10.加入SP復合物孵育20-30分鍾。 11.PBS洗3次,每次2分鍾。 12.DAB-H2O2孵育5-10分鍾。 13.PBS洗,水洗。 14.Harris蘇木素染核5-10分鍾。 15.水洗,分化 ,藍化,脫水,透明並封固。生物幫上面有的,去看看吧, http://www.bio1000.com/zt/disease/ 疾病機理,疾病研究。

5. 高中常用化學染色劑

甲基橙的變色范圍是pH<3.1時變紅,3.1~4.4時呈橙色,pH>4.4時變黃。
酚酞在酸性溶液中為無色,在鹼性溶液中為紫紅色,變色范圍是8.2~10.0
甲基紅的變色范圍4.2~9.2,由紅色變成橙色

紫色石蕊 5.0-8.0 由紅色變為 藍色

6. 常用染色劑的主要配方

1、酸性品紅 酸性品紅是酸性染料,呈紅色粉末狀,能容於水,略溶於酒精(0.3%)。他是良好的細胞制染色劑,在動物製片上應用很廣,在植物製片上用來染皮層、髓部等薄壁細胞和纖維素壁。他跟甲基綠同染,能顯示線粒體。
組織切片在染色前先浸在帶酸性的水中,可增強它的染色力。酸性品紅容易跟鹼起作用,所以染色過度,易在自來水中褪色。
2、剛果紅 剛果紅是酸性染料,呈棗紅色粉末狀,能溶於水和酒精,遇酸呈藍色。他能作染料,也用作指示劑。他在植物製片中常作為蘇木精或其他細胞染料的襯墊劑。他用來染細胞質時,能把膠制或纖維素染成紅色。在動物組織製片中用來染神經軸、彈性纖維、胚胎材料等。剛果紅可以跟蘇木靜作二重染色,也可用作類澱粉染色,由於他能溶於水和酒精,所以洗滌和脫水處理要迅速。
3、甲基藍 甲基藍是弱酸性染料,能溶於水和酒精。甲基藍在動植物的製片技術方面應用極廣。他跟伊紅合用能染神經細胞,也是細菌製片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生動物的活體染色劑。甲基藍極易氧化,因此用他染色後不能長久保存。
4、固綠 固綠是酸性染料,能溶於水(溶解度為4%)和酒精(溶解度為9%)。固綠是一種染含有漿質的纖維素細胞組織的染色劑,在染細胞和植物組織上應用極廣。他和蘇木精、番紅並列為植物組織學上三中最常用的染料。
5、蘇丹Ⅲ 蘇丹Ⅲ是弱酸性染料,呈紅色粉末狀,易溶於脂肪和酒精(溶解度為0.15%)。蘇丹Ⅲ是脂肪染色劑。
6、伊紅 這類染料種類很多。常用的伊紅Y,是酸性染料,呈紅色帶藍的小結晶或棕色粉末狀,溶於水(15攝氏度是溶解度達44%)和酒精(溶於無水酒精的溶解度為2%)。伊紅在動物製片中廣泛應用,是很好的細胞質染料,常用作蘇木精的襯染劑。
7、鹼性品(復)紅 鹼性品紅是鹼性染料,呈暗紅色粉末或結晶狀,能溶於水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。鹼性品紅在生物學製片中用途很廣,可用來染色膠原纖維、彈性纖維、嗜復紅性顆粒和中樞神經組織的核質。在生物學製片中用來染維管束植物的木質化壁,又作為原球藻、輪藻的整體染色。在細菌學製片中,長用來鑒別結核桿菌。在 爾根氏反應中用作組織化學試劑,已核查脫氧核糖核酸。
8、結晶紫 結晶紫是鹼性染料,能溶於水(溶解度9%)和酒精(溶解度8.75%)。結晶紫在細胞學、組織學和細菌學等方面應用極廣,是一種優良的染色劑。他是細胞核染色常用的,用來顯示染色體的中心體,並可染澱粉、纖維蛋白、神經膠質等。凡是用番紅和蘇木精或其他染料染細胞核不能成功時,用它能得到良好的結果。用番紅和結晶紫作染色體的二重染色,染色體染成紅色,紡錘絲染成紫色,所以也是一種顯示細胞分裂的優良染色劑。用結晶紫染纖毛,效果也很好。用結晶紫染色的切片,缺點是不易長久保存。
9、龍膽紫 龍膽紫是混合的鹼性染料,主要是結晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,龍膽紫能跟結晶紫互相替用。醫葯上用的紫葯水,主要成分是甲基紫,需要時能代替龍膽紫和結晶紫。
10、中性紅 中性紅是弱鹼性染料,呈紅色粉末狀,能溶於水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。它的鹼性溶液中呈現黃色,在強鹼性溶液中呈藍色,而在弱酸性溶液中呈紅色,所以能用作指示劑。中性紅無毒,常做活體染色的染料,用來染原生動物和顯示動植物組織中活細胞的內含物等。陳久的中性紅水溶液,用作顯示尼爾體的常用染料。
11、番紅 番紅是鹼性染料,能溶於水和酒精。番紅是細胞學和動植物組織學生常用的染料,能染細胞核、染色體和植物蛋白質,示維管束植物木質化、木栓化和角質化的組織,還能染孢子囊。
12、亞甲藍或美藍 亞甲藍或美藍是鹼性染料,呈藍色粉末狀,能溶於水(溶解度9.5%)和酒精(溶解度6%)。亞甲藍是動物學和細胞學染色上十分重要的細胞核染料,其優點是染色不會過深。
13、甲基綠 甲基綠是鹼性染料。它是綠色粉末狀,能溶於水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基綠是最有價值的細胞和染色劑,細胞學上常用來染染色質,跟酸性品紅一起可作植物木質部的染色。
把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,邊加邊攪拌,如果產生沉澱,要過濾。本尼迪克溶液配製後能長期使用(存放時間較久而產生沉澱是,取上層清液使用,不必重新配製)。
本尼迪克溶液用來測試食物、血液和尿中的葡萄糖,可測出0.15 ~0.20%的葡萄糖。這種溶液跟未知物同加熱時,如果未知物中有葡萄糖,會形成紅色的氧化亞銅沉澱物。

7. NAS-DCE染色

NAS–DAE 醋酸AS–D萘酚酯酶 存在於單核系、粒系和淋巴系細胞中。血細胞內的NAS-DAE在pH中性的條件下能水解基質液中醋酸AS–D萘酚,釋放AS–D萘酚,後者與基質液中的重氮鹽偶聯形成不溶性的有色沉澱,定位於細胞質內酶所在的部位。

8. 高中生物實驗中常用的染料有哪些

1、龍膽紫,又名甲紫、結晶紫

甲紫屬於三苯甲烷類染料消毒劑,和微生物酶系統發生氫離子的競爭性對抗,使酶成為無活性的氧化狀態,從而發揮殺菌作用。主要對革蘭氏陽性菌如葡萄球菌、白喉桿菌,以及綠膿桿菌、白念珠菌、表皮癬菌有殺滅作用,對其他革蘭氏陰性菌和抗酸菌幾乎無作用。

2、醋酸洋紅

在塗抹法與壓碎法中,醋酸洋紅常被用作核、染色體的固定和染色劑。在煮沸的45%醋酸中加洋紅使之飽和,再加入微量的鐵離子,便使醋酸洋紅材料在為醋酸固定的同時,洋紅將核或染色體染成紅色。PH呈酸性。

3、斐林試劑

二價銅離子的酒石酸鉀鈉配合物,可以被脂肪醛或還原性糖還原為氧化亞銅。斐林試劑為深藍色溶液, 在與脂肪醛或還原性糖共熱時, 藍色消失,析出紅色的氧化亞銅沉澱。在氧化亞銅析出過程中, 反應液的顏色可能經過由藍色→綠色→黃色→紅色沉澱的逐漸變化,反應較快時,直接觀察到紅色沉澱。

它與可溶性的還原性糖(葡萄糖、果糖和麥芽糖)在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的氧化亞銅沉澱。因此,斐林試劑常用於鑒定可溶性的還原性糖的存在與否。

4、班氏試劑

本尼迪特試劑,也稱班氏試劑、本尼迪克試劑、本尼迪克試液或班乃德試劑,是一種淺藍色化學試劑。本尼迪特試劑是斐林試劑的改良試劑,它與醛或醛糖反應生成紅黃色沉澱。它是由硫酸銅、檸檬酸鈉和無水碳酸鈉配置成的藍色溶液,可以存放備用,避免斐林溶液必須現配現用的缺點。

5、酚酞

酚酞是一種常用酸鹼指示劑,廣泛應用於酸鹼滴定過程中。通常情況下酚酞遇酸溶液不變色,遇中性溶液也不變色,遇鹼溶液變紅色。

6、溴麝香草酚藍

溴麝香草酚藍(Bromothymol Blue),又名溴百里香酚藍。英文簡稱BTB。溴麝香草酚藍是一種酸鹼指示劑、吸附指示劑。 在生物學實驗中常用作水生生物的呼吸試劑。

9. 組織學的染色方法有哪些

1、HE染色也叫蘇木精-伊紅染色法,是病理科切片染色技術中最常見的染色方法之一。HE染色法也是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中最基本、使用最廣泛的技術方法。HE染色利用蘇木素和伊紅分別顯示胞核和胞漿,可以區分出一般細胞的形態,在實際應用中可以鑒別組織、細胞的病理學改變,在臨床病理工作中是診斷良惡性疾病的最基本的染色方法。
2、免疫組化染色。是根據抗原和抗體特異性結合的原理,通過化學反應,使標記抗體的顯色劑顯色,來確定組織細胞內抗原的定位、定性及相對定量,是臨床病理診斷中常用的輔助病理診斷和分子分型、預後預測等重要的病理學染色技術。
3、PAS染色。又稱過碘酸-雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示細胞內或細胞外的糖原和其他多糖物質。
4、巴氏染色。是脫落細胞染色中最好的染色方法。收起全部↑

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