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微生物如何看平板菌落

发布时间:2022-04-14 10:47:55

微生物检验中饮料的大肠菌群平板计数法具体操作步骤是怎样的

两个平板总共挑选10个典型菌落或者是可疑菌落(是五五分还是四六分这个全凭你心情了),有的菌落长的在10个以下的就有几个接种几管就OK了。
每次接种前将典型和可疑菌落分类,哪个多就多接种几管,少的就少接种几管,每个样品只需选15-150菌落间的稀释度接种BGLB管。
接种的目的是看是否产气且是否有大肠。

② 要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键为什么

1、无菌操作。

2、稀释良好,不会太浓或太稀。

3、菌落生长时间控制好,不会长的太大不便区分,也不至于太小影响计数。

首先将待测样品作一系列稀释,稀释度的选择很重要,以三个稀释度中的第二稀释度倒平板所出现的平均菌落数在50个左右为最好。

再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中,使其均匀分布于平皿中的培养培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可换算出样品中的含培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可换算出样品中的含菌数。



(2)微生物如何看平板菌落扩展阅读

检测食品中微生物数量,一般采用标准平板菌落计数法(SPC)对食品中的活的微生物进行菌落形成单位(CFU)数量的检测。

即将部分样品取出混合均匀,用适当的稀释液进行梯度稀释,取一定量的稀释液涂布或倾注琼脂平板,在合适的温度下培养一定的时间,然后通过肉眼观察或电子计数器对所有可见菌落进行计数。

虽然日常检测大多采用倾注平板的方法,但是涂布法在检测热敏性菌体方面更有优势,能取得更好的计数结果,而且更适合于严格好氧菌。涂布法的缺点是涂布时琼脂表面不干燥和培养后菌落蔓延导致无法计数。

使用注意事项

仪器要放在平整牢固的试验台上,点数时,探笔不要过于倾斜,轻点至有弹跳感,数字即可显示。仪器应防尘,放大镜表面的灰尘,要用纯化水清洗后,再用镜头纸擦拭干净即可,另外还应防潮、防剧烈震动、防日光曝晒、防酸碱等,使用完后加防护罩。仪器及探笔非专业人员不能拆卸,有故障,请专业技术人员检修。

③ 如何从平板菌落的形态,与基质结合的紧密程度等来区分细菌

菌落(colony)是由单个细菌(或其他微生物)细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度,形成肉眼可见的子细胞群落。菌落特征与微生物的菌体形态结构特征密切相关。
应该注意菌落的特征有:大小、形状、颜色、表面是否湿润、周围培养基的改变、气味、性状等等。

④ 平板菌落计数的原理是什么它适用于哪些微生物的计数

原理:
将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂布到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞;统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
适用于:

通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量。

⑤ 食品微生物检验中的平板菌落数的选择,选取菌落数在15到150之间,应怎么做呢

(1)首先,我们写报告选取的菌落数在30~300CFU,03版的和2010版的国标都是这么规定的,我不知道你们为什么选15到150。其次,出现的典型和可疑大肠菌群菌落数是指一个稀释级别的两块平板的菌落数的平均数。举例:如果有一个超过了150,而一个没有超过,有两种可能,第一,你的实验中受到了污染,或者说加样品稀释液的量少了。解决方法,实验前要确保实验的整个流程都是无菌的,实验的环境是否紫外消毒,通风情况,样品打开前是否对包装进行75%酒精消毒,是否点酒精灯,实验穿的白大衣是否经紫外照射,实验时是否带口罩,脚套,头套;加稀释液的时候应 用枪(微量移液器)加样。第二说明你选的这个范围无法弥补实验中产生的误差,简单的说你可以选30~300CFU进行报告。
(2)指的是一个稀释级别的2个平板共移种10管,每个板子5管。至于你说的3个稀释级别问题,你可以想一下,加入第一个稀释级别是150cfu,第二个就应该在15cfu左右,第三个就该是1~2cfu左右,不在15~150cfu之间啊,你没必要报告它呀,只需报前两个稀释度的。所以,一般做实验只用作两个稀释度的就行了。

⑥ 微生物平板菌落计数法具体实验步骤

一、目的要求

学习平板菌落计数的基本原理和方法。

二、基本原理

平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的,也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中,使其均匀分布于平皿中的培养基内,经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可换算出样品中的含菌数。

这种计数法的优点是能测出样品中的活菌数。此法常用于某些成品检定(如杀虫菌剂),生物制品检定以及食品、水源的污染程度的检定等。但平板菌落计数法的手续较繁,而且测定值常受各种因素的影响。

三、器材

大肠杆菌悬液,牛肉膏蛋白胨培养基, 1ml无菌吸管,无菌平皿,盛有4. 5 ml无菌水的试管,试管架和记号笔等。

四、操作步骤

1.编号:

取无菌平皿 9套,分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6各3套。另取6支盛有4.5ml无菌水的试管,排列于试管架上,依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。

2.稀释

用1ml无菌吸管精确地吸取0.5ml大肠杆菌悬液放入10-1的试管中,注意吸管尖端不要碰到液面,以免吹出时,管内液体外溢。然后仍用此吸管将管内悬液来回吸吹三次,吸时伸入管底,吹时离开水面,使其混合均匀。另取一支吸管自10-1试管吸0.5ml放入10-2试管中,吸吹三次,……其余依次类推。整个稀释过程如图Ⅷ-3。

3.取样

用3支1ml无菌吸管分别精确地吸取10-4、10-5、10-6的稀释菌液0.2ml,对号放入编好号的无菌培养皿中。

4.倒平板

于上述盛有不同稀释度菌液的培养皿中,倒入溶化后冷却至45℃左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基约10—15ml,置水平位置,迅速旋动混匀,待凝固后,倒置于37℃温室中培养。

5.计数

培养24小时后,取出培养皿,算出同一稀释度三个平皿上的菌落平均数,并按下列公式进行计算:

每毫升中总活菌数=同一稀释度三次重复的菌落平均数×稀释倍数×5

一般选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释度计算每毫升的菌数最为合适。同一稀释度的三个重复的菌数不能相差很悬殊。由10-4、10-5、10-6三个稀释度计算出的每毫升菌液中总活菌数也不能相差悬殊,如相差较大,表示试验不精确。

平板菌落计数法,所选择倒平板的稀释度是很重要的,一般以三个稀释度中的第二稀释度倒平板所出现的平均菌落数在50个左右为最好。

平板菌蓓计数法的操作除上述的以外,还可用涂布平板的方法进行。二者操作基本相同,所不同的是涂布平板法是先将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化后倒平板,待凝固后编号,并于 37℃温室中烘烤30分钟左右,使其干燥,然后用无菌吸管吸取 0.2ml菌液对号接种于不同稀释度编号的培养皿中的培养基上,再用无菌玻璃刮棒将菌液在平板上涂布均匀,平放于实验台上20—30分钟,使菌液渗透入培养基内,然后再倒置于37℃的温室中培养。

五、实验报告

1.结果

将计数结果填入下表。

2.思考题

(1)为什么溶化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板?

(2)要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键?为什么?

(3)同一种菌液用血球计数板和平板菌落计数法同时计数,所得结果是否一样?为什么?

(4)试比较平板菌落计数法和显微镜下直接计数法的优缺点。

⑦ 我是新手,想问一下微生物检验菌落总数测定具体操作步骤

O(∩_∩)O~我的那本微生物的书上有,但是太多了。我就偷懒一下,那个你先看看,若不行,我再翻书~~~
7操作步骤
7.1检样稀释及培养
7.1.1以无菌操作,取样25mL或25 g放入225mL灭菌生理盐水中,经充分振摇作成1:10均匀稀释液。

固体检样在加入稀释液后,最好置均质器中以8000r/min~10000r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。

7.1.2用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1∶100的稀释液。
7.1.3另取1mL灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1mL火菌吸管。
7.1.4根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。
7.1.5稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46±1℃水浴保温)注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照

7.1.6待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h。
7.2菌落计数方法
做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
7.3菌落计数的报告
7.3.1平板菌落数的选择
选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如果有不同来源的几条链,则应将每条链作为一个菌落计。
7.3.2稀释度的选择
7.3.2.1应选择平均菌落数在30~300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见表1中例1)。
7.3.2.2若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30~300之间,则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2,应报告其平均数;若大于2则报告其中较小的数字(见表中例2及3)。
7.3.2.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例4)。
7.3.2.4若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例5)。
7.3.2.5若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数报告之(见表1中例6)。
7.3.2.6若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,其中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之

⑧ 微生物实验中ss平板培养的结果分析

SS平板用途: 用于沙门氏菌,志贺氏菌的选择性分离培养
胨、牛肉膏粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;乳糖、葡萄糖为可发酵的糖类;三号胆盐、柠檬酸钠和煌绿抑制革兰氏阳性菌及大多数的大肠菌群和变形杆菌,但不影响沙门氏菌的生长;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;中性红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为无色。
根据平板颜色确定菌落。

⑨ 怎样用平板菌落计数法测定微生物活菌数

1.先将微生物制成菌悬液
2.梯度稀释
3.涂平板
4.培养,计算菌落数,然后算出菌悬液单位体积的活菌数

⑩ 微生物平板培养,怎样识别单菌落及如何描述

如果你接种的足够稀释的话(这个纯粹凭经验了),一个菌落就是单菌落。
描述内容:菌落大小,颜色,形状(边缘是否规则,中心是否凹凸),粘稠或者干燥,与培养基结合是否紧密,是否有可见孢子粉,气味。

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