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生物素标记是什么

发布时间:2022-08-19 07:15:35

⑴ 生物素与地高辛,有什么大的区别吗

生物素(Biotin)和地高辛(digoxigenin)都是非放射性标记物是。二者都是半抗原。生物素是一种小分子水溶性维生素,对亲和素有独特的亲和力,两者能形成稳定的复合物,通过连接在亲和素或抗生物素蛋白上的显色物质(如酶、荧光素等)进行检测。地高辛是一种类固醇半抗原分子,可利用其抗体进行免疫检测,原理类似于生物素的检测。地高辛标记核酸探针的检测灵敏度可与放射性同位素标记的相当,而特异性优于生物素标记,其应用日趋广泛。

⑵ 生物素标记的一抗能用来做免疫荧光吗

生物素(biotin)是没有荧光的,但是亲和素(avidin)能与生物素结合,故荧光标记的亲和素能结合生物素并被激发出荧光。

⑶ 生物素标记和辣根过氧化物酶标记有什么区别

EMSA结合反应:(1) 如下设置EMSA结合反应阴性对照反应:Nuclease-Free Water 7微升EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) 2微升细胞核蛋白或纯化的转录因子 0微升标记好的探针 1微升总体积 10微升样品反应:Nuclease-Free Water 5微升EMSA/Gel-Shift结合...
BAS-ELISA是在常规ELISA原理的基础上,结合生物素(B)与亲和素(A)间的高度放大作用,而建立的一种检测系统。生物素很易与蛋白质(如抗体等)以共价键结合。这样,结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应,既起到了多级放大作用,又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色,达到检测未知抗原(或抗体)分子的目的。

⑷ 求助生物素-亲和素标记技术的优缺点

BAS在实际应用中所具有的巨大优越性,主要表现在以下几个方面。

灵敏度
生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。

特异性
亲和素与生物素间的结合具有极高的亲和力,其反应呈高度专一性。因此,BAS的多层次放大作用在提高灵敏度的同时,并不增加非特异性干扰。而且,BAS结合特性不会因反应试剂的高度稀释而受影响,使其在实际应用中可最大限度地降低反应试剂的非特异作用。

稳定性
亲和素结合生物素的亲和常数可为抗原-抗体反应的百万倍,二者结合形成复合物的解离常数很小,呈不可逆反应性;而且酸、碱、变性剂、蛋白溶解酶以及有机溶剂均不影响其结合。因此,BAS在实际应用中,产物的稳定性高,从而可降低操作误差,提高测定的精确度。

普适性
生物素-亲和素系统的多功能性还能提供一套统一的研究方法。例如对于某待测分子,已经得到了对于该分子的生物素标记抗原,那么配合结合亲和素的胶体金可以在电镜下观测,配合结合荧光标记的亲和素可以使用流式细胞仪筛选,配合连接到酶的亲和素可以进行ELISA等免疫组化实验。

其他
BAS可依据具体实验方法要求制成多种通用性试剂(如生物素化第二抗体等)适用于不同的反应体系,而且都可高度稀释,用量很少,实验成本低;尤其是BAS与成本高昂的抗原特异性第一抗体偶联使用,可使后者的用量大幅度减少,节约实验费用.此外,由于生物素与亲和素的结合具高速、高效的特性,尽管BAS的反应层次较多,但所需的温育时间不长,实验往往只需数小时即可完成

⑸ 生物素标记的DNA探针用什么方法检测

生物素标记的DNA探针用什么方法检测
以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板,人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段,可用来快速检测病原体.
怎么检测:
将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针.可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合,经放射自显影或其他检测手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在.
以细菌为例,目前分子杂交技术用于细菌的分类和菌种鉴定比之G+C百分比值要准确的多,是细菌分类学的一个发展方向.加之分子杂交技术的高敏感性,分子杂交在临床微生物诊断上具有广阔的前景.细菌的基因组大小约5×106bp,约含3000个基因.(各种细菌之间绝大部分DNA是相同的,要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法,即将细菌DNA切成小片段后分别克隆得到包含基因组的全信息的克隆库.然后用多种其它菌种的DNA作探针来筛选,产生杂交信号的克隆被剔除,最后剩下的不与任何其它细菌杂交的克隆则可能含有该细菌特异性DNA片段.将此重组质粒标记后作探针进一步鉴定,亦可经DNA序列分析鉴定其基因来源和功能.)括号里比较重要!

⑹ 生物素是什么意思及作用

一、生物素的定义:生物素又称维生素H、辅酶R,是水溶性维生素,也属于维生素B族,B7。它是合成维生素C的必要物质,是脂肪和蛋白质正常代谢不可或缺的物质。是一种维持人体自然生长、发育和正常人体机能健康必要的营养素。

生物素是20世纪30年代在研究酵母生长因子和根瘤菌的生长与呼吸促进因子时,从肝中发现的一种可以防治由于喂食生鸡蛋蛋白诱导的大鼠脱毛和皮肤损伤的因子。

二、生物素的用途:生物素,即人们所熟知的维生素H,它能使身体将食物转化为自身能量。生物素有利于细胞的健康和再生。糖尿病患者可以通过生物素改善血糖的调节。头发和指甲的健康也需要生物素。

(1)保健用途

糖尿病。补充生物素,生物素通过改善胰岛素和血糖的使用帮助改善血糖的调节。头发和指甲。补充生物素可以修复薄弱爆裂的脚趾甲和手指甲,改善头发的健康。生物素也可以修复那些由于生物素水平偏低引起过早的灰白头发。

(2)美容用途

生物素具有出色的美容作用,可保持皮肤嫩白、指甲光滑等。这个发现也为生物素产品开拓了一大新药业用途。美容化妆品行业是国际大产业之一,美容化妆品的国际市场总销售额远远高于药品的销售额,生物素在美肤、美甲(指甲)及美发上的新应用必将导致药用级生物素销量的上升。

(3)科研用途

生物素可以用作核酸探针的标记物,它能与核酸分子的UTP或dUTP 5‘位上的C相结合,并可与亲和素结合而被检测。在检测的过程中,生物素只用作固定连接,而不用作信号检测。

(6)生物素标记是什么扩展阅读:

生物素的食物来源:

(1)在牛奶、牛肝、蛋黄、动物肾脏、草莓、柚子、葡萄等水果、瘦肉、糙米、啤酒、小麦中都含有生物素。在复合维生素B和多种维生素的制剂中,通常都含有维生素H。

(2)富含该维生素的美食:芥末双脆、 蟹肉西兰花、芥茉菠菜、鱼香腰花、油焖鳝鱼、素炒三丝、蛋黄南瓜、芒果柳橙苹果汁、胡萝卜炖羊肉、松花淡菜粥、清炖萝卜牛肉、银杞明目汤、鸡肝胡萝卜粥、牛肉蔬

(3)菜浓汤、芒果葡萄柚汁、芒果柳橙苹果汁、木瓜生姜汁、芦荟柠檬汁、甜橙柠檬汁、杏猕猴桃汁。

⑺ 生物素标记肽的应用

生物素标记肽可用于蛋白纯化、检测、固化、药物导向、蛋白质结构分析等。

检测与某一多肽相互作用的物质,最简单的方法就是利用此多肽做亲和pull-down实验,然后直接检测结合蛋白。蛋白质体外结合(Pull-down)试验可用于验证蛋白-蛋白相互作用的存在(经由别的研究方法预测过的,如免疫共沉淀)和作为一种初级的筛选试验来识别一些未知的蛋白-蛋白相互作用。通过竞争性阻断结合,合成肽通常被用来验证被假设的蛋白质-蛋白质相互作用。

⑻ 固相夹心酶联免疫吸附实验中的生物素标记物的作用是什么

不知道您说的是不是ELISA 要是ELISA您说的生物素标记物应该是常叫的2抗或酶标抗体吧?就是抗体和HRP复合物,标记物的主要作用是催化H2O2分解,使H2O2能够和底物(如OPD TMB等供氢物质)反应发生变色,通过变色的情况,具体是测量OD值,进而来确定抗原与抗体的结合量。生物素标记物的主要作用就是放大反应,让反应进行迅速从而易得出结果。楼主可以参考http://..com/question/178722134.html这个,主要是还是先深入接触下夹心法的酶联免疫法,这样理解起来问题比较容易,祝楼主学习顺利,纯手打,望采纳!

⑼ 标记抗体的生物素标记

生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。

⑽ 什么是生物素标签

应该是在基因工程中所用到的类似于抗生素类的基因标记标签

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