怎么样镜检微生物

① 微生物镜检的化验怎么做

做微生物镜检首先要对微生物进行培养，
1.一般适温培养18-24h，
2.革兰氏染色：1）涂片固定。
2）草酸铵结晶紫染1分钟。
3）自来水冲洗。
4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。
5）水洗，用吸水纸吸去水分。
6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。
7）蕃红染色液（稀）染2分钟后，自来水冲洗。
3.干燥，镜检。

② 微生物学的检查方法是有哪些

微生物学检查法

标本

因鼠疫传染性极强，采集标本时必须严格无菌操作。根据病型采取淋巴结穿刺液、肿胀部位组织液、脓汁，血液和痰等。人和动物尸体可取肝、脾、肺、病变淋巴结以及心血等。陈旧尸体取骨髓。将采集标本送至有严密防护措施的专门实验室进行检查，禁止在一般实验室进行操作。

直接涂片镜检

除血液标本外，一般均需涂片或印片，干燥后用甲醇固定，革兰染色或吕氏美兰染色，镜检。在不同材料中，菌体大小、形态有很大差异，除典型形态外，往往可见菌体呈多形态性，需加以注意。

分离培养与鉴定

血液标本需先置肉汤中进行增菌培养。分离培养一般选用血琼脂平板，28摄氏度24小时后，可见较小的露滴状菌落，继续培养则菌落增大至1～2毫米，中央厚而致密，周边逐渐变薄。取可疑菌落进行涂片染色镜检，噬菌体裂解试验，血清凝集试验，特异荧光抗体染色等作出鉴订。

血清学试验

可用于检查鼠疫耶尔森菌抗原或特异性抗体。敏感而特异的试验方法有ELISA、固相放射免疫分析，SPA协同凝集试验等。

检测核酸

用DNA探针杂交方法或PCR技术检测鼠疫耶尔森菌核酸，有助于鼠疫的诊断。PCR敏感性极高，蚤体内有10个鼠疫耶尔森菌感染即可用PCR技术检出。

诊断检查

诊断：取决于病人有接触史及肺部受累表现，病因诊断取决于痰、血或淋巴结吸出物革兰染色、培养，有条件的单位可作直接荧光素标记抗体染色，可提供快速的病因诊断。

③ 怎么制作微生物的制片，然后用显微镜观察

(1) 以油性签字笔在载玻片之背面画个圈 并写上所要鉴定之细菌的名称。
，
(2) 在圆圈正面滴上一滴水，水滴越小滴越好，如有需要，可将多馀的水
擦去。
(3) 用牙签沾取一点菌落涂于载玻片正面的圆圈中(勿沾取太多的细菌)。
(4) 待涂布的菌液完全风乾后(切记不可用火烧乾，以免破坏细菌细胞壁的
结构)，让载玻片在火上來回數次，使细菌固定(每次通过火焰后均需
稍冷却，载玻片之温度以不烫手为原则)。

一）正置显微镜

1、安放

右手握住镜臂，左手托住镜座，使镜体保持直立。桌面要清洁、平稳，要选择临窗或光线充足的地方。单筒的一般放在左侧，距离桌边3～4厘米处。

2、清洁

检查显微镜是否有毛病，是否清洁，镜身机械部分可用干净软布擦拭。透镜要用擦镜纸擦拭，如有胶或粘污，可用少量二甲苯清洁之。

3、对光

镜筒升至距载物台1～2厘米处，低倍镜对准通光孔。调节光圈和反光镜，光线强时用平面镜，光线弱时用凹面镜，反光镜要用双手转动。
若使用的为带有光源的显微镜，可省去次步骤，但需要调节光亮度的旋钮。

4、安装标本

将玻片放在载物台上，注意有盖玻片的一面一定朝上。用弹簧夹将玻片固定，转动平台移动器的旋钮，使要观察的材料对准通光孔中央。

5、调焦

调焦时，先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒，并从侧面仔细观察，直到物镜贴近玻片标本，然后左眼自目镜观察，左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本物像时停止，再用细调焦旋钮回调清晰。
操作注意：不应在高倍镜下直接调焦；镜筒下降时，应从侧面观察镜筒和标本间的间距；要了解物距的临界值。
若使用双筒显微镜，如观察者双眼视度有差异，可靠视度调节圈调节。另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距。

6、观察

若使用单筒显微镜，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。
镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。
光强的调节：一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。除调节反光镜或光源灯以外，虹彩光圈的调节也十分重要。

（1）低倍镜观察

观察任何标本时，都必须先使用低倍镜，因为其视野大，易发现目标和确定要观察的部位。

（2）高倍镜观察

从低倍镜转至高倍时，只需略微调动细调焦旋钮，即可使物像清晰。
使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮，否则易压碎盖玻片并损伤镜头。
转动物镜转换器时，不可用手指直接推转物镜，这样容易使物镜的光轴发生偏斜，转换器螺纹受力不均匀而破坏，最后导致转换器就会报废。

（3）油镜的观察

先用低倍镜及高倍镜将被检物体移至视野中央后，再换油镜观察。油镜观察前，应将显微镜亮度调整至最亮，光圈完全打开。
使用油镜时，先在盖玻片上滴加一滴香柏油（镜油），然后降低镜筒并从侧面仔细观察，直到油镜浸入香柏油并贴近玻片标本，然后用目镜观察，并用细调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本的焦段时停止并调节清晰。
香柏油滴加要适量。油镜使用完毕后一定要用擦镜纸沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦镜纸擦去多余二甲苯。

7、结束操作

观察完毕，移去样品，扭转转换器，使镜头V字型偏于两旁，反光镜要竖立，降下镜筒，擦抹干净，并套上镜套。
若使用的是带有光源的显微镜，需要调节亮度旋钮将光亮度调至最暗，再关闭电源按钮，以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源灯

④ 微生物镜检涂片步骤

单染色法，以观察菌体形态为主。
1、把泡在酒精中的片子用镊子夹出，放在酒精灯上点燃，去掉片子上的酒精及油脂。
2、片子冷却后，蘸一接种环发酵液，均匀地涂在片子上。
3、涂后的片子，于酒精灯火焰上过几遍，使所涂的细菌固定在片子上，注意，片子温度不易过高，以不烫手背为主，温度过高，会使菌变形，影响观察结果。
4、片子涂菌的位置，滴几滴结晶紫染液，使染液完全覆盖住所涂的菌，染1分钟左右。
5、用水冲洗片子至无紫色水流下后，进行火焰烤干。
6、镜下观察。在涂点处滴1滴香柏油，于油镜下观察菌体形态。

⑤ 微生物镜检

常规细菌培养18-24h镜检，（固体培养基）整个细菌集落生长已经较标准，当形成了非常典型的菌落观后镜检就可以了。原则上只要能看见菌落都可以进行染色镜检，但是总体说来，细菌整体进入静止期乃至更长时间，细菌多形性就会更加明显，G+细菌往往被染成G-，影响对细菌形态的观察。液体培养基也是这样，培养时间过长或者保存时间过长的细菌培养液或者细菌平板，细菌着色不均或者异染颗粒增多，菌体多形性
芽孢杆菌必须在芽孢形成后进行镜检，成链细菌也必须把握染色时间和染色方法，以便细菌长链或者特殊形态的观察。这些都是基于细菌本身生长时间而定。

⑥ 如何用镜检的方法识别微生物用镜检识别细

这个其实是非常非常复杂的，如果是光镜，需要特殊的染色，而且微生物个体十分小，光镜下一般都看不清，更别说分辨了，在具体操作中都是按自己的经验来的，有荚膜的肯定是细菌，放射状丝线的是放线菌，霉菌可以看见菌丝，成熟的可以看见孢子，原生动物一般个体大，多个核，细胞器非常复杂而且形状特殊，体表被纤毛，后生动物，那肯定就是多细胞的了……大部分要去细细研读微生物教材……熟记他们的特征，而且……想在光镜下分辨，很难。

⑦ 怎样做微生物的镜检

取一滴试液，放载玻片上，盖上盖玻片，放显微镜下看就行了。如果需要计数，就是用血球计数板。这是最简单的了，不过这样恐怕看不出什么啊。光是看形态来判断种类吗？

⑧ 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些

1、快速测试片技术法

快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。

细菌总数检测纸片的研制始于 20 世纪 80 年代，其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来以滤纸和美国某公司的 Petrifilm 为载体的测试片已开始被广泛应用。

2、生物电化学方法

生物电化学方法是指通过电极测定微生物产生或消耗的电荷，从而提供分析信号的方法。微生物在滋生代谢过程中，培养基的电化学性质如电流、电位、电阻和电导等会发生变化，所以可以通过检测分析这些电化学参量的变化来实现对微生物的快速测定。

常见的有：阻抗分析法、电位分析法、电流分析法等。生物电化学方法具有测量快速、直观、操作简单、测量设备成本低和信号的可控性等特点。

3、微菌落技术

微菌落是指细菌生长繁殖早期在固相载体上所形成的只能借助于显微镜观察的微小菌落。微菌落技术具有快速、经济、实用的特点，其研究始于 20 世纪50年代，定量测定技术从 20 世纪 70 年代开始，国外已有报道将该法应用于水、食品中细菌总数的快速检测。

4、气相色谱法

气相色谱应用到微生物的检测中，主要是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物各异，利用上述色谱检测可直接分析各种体液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白质、氨基酸、多肽、多糖等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

5、高效液相色谱法

利用高效液相色谱检测可分析各种体液中的细菌代谢产物、病原微生物等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

⑨ 微生物的鉴定方法

鉴定方法很多

1、送到鉴定机构里面，自己只需要准备样品

2、如果自己做鉴定，方法如下：
各种染色方法+镜检
筛选培养基
荧光定量PCR

⑩ 做微生物实验的步骤

操作步骤
1．涂片将培养14—16小时的枯草芽孢杆菌和培养24小时的大肠杆菌分别作涂片（注意涂片切不可过于浓厚），干燥、固定。固定时通过火焰1—2次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。
2．染色
（1）初染
加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟，水洗。
（2）媒染
滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。
（3）脱色
将载玻片上面的水甩净，并衬以白背景，用95％酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止，约20—30秒钟，立即用水冲净酒精。
（4）复染
用番红液染1—2分钟，水洗。
（5）镜检
干燥后，置油镜观察。革兰氏阴性菌呈红色，革兰氏阳性菌呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准，过于密集的细菌，常常呈假阳性。
（6）同法在一载玻片上以大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合制片，作革兰氏染色对比。
革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性菌可被误染为阴性菌；而脱色不够时，阴性菌可被误染为阳性菌。此外，菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间过长，或已死亡及部分菌自行溶解了，都常呈阴性反应。