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免疫组织化学染色怎么检查

发布时间:2022-08-07 18:09:21

A. 免疫组织化学染色诊断是什么意思 免疫组织化学染色诊断的含义

1、在抗体上结合荧光免疫组织化学染色法是指在抗体上结合荧光或者可呈色的化学物质,利用免疫学原理中的抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否含有目标抗原的存在,此方法不止可以用来测知抗原的表现量,也可以观察抗原所表现的位置。

2、只要能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质。包括蛋白质、核酸、多糖、病原体,都可以进行侦测。免疫组织化学的优势在于专一性、灵敏度、简便快速以及成本低廉,所以广泛为医院采用,通常是借由特定的肿瘤标记来筛选癌症。因此,免疫组织化学染色诊断是随着免疫组织化学技术发展的和各种特异性的抗体的出现,使许多肿瘤得到了明确的诊断。

B. 酶免疫细胞如何进行化学染色

免疫细胞化学染色是将血液、骨髓液、浆膜腔积液等等各种体液组织制成的涂片和骨髓等组织的切片经各种单克隆抗体的标定和常用的过氧化物酶或碱性磷酸酶显色后对白血病细胞直接镜检,以确定细胞类型。
免疫组织化学染色方法繁多,可根据标记物的不同分为:免疫酶细胞化学染色、免疫荧光细胞化学染色、免疫金银染色技术以及亲合免疫组织化学染色技术等。目前血液系统疾病检查常用免疫细胞化学染色方法有三种:过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法、碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)法和亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC-AP)法。PAP法抗原、抗体反应及酶标原理与APAAP法完全相同,都属于免疫组织化学反应,只是所标记的酶不同。PAP法酶化学反应原理与ABC-AP法完全相同,但ABC-AP法为亲合免疫组织化学反应。在染色步骤及方法上PAP法和ABC-AP法完全相同。
免疫细胞化学能够识别抗原蛋白质一级结构中氨基酸的差别,从而对细胞结构、功能及细胞代谢等进行综合分析,确定细胞的类型、来源及细胞的分化阶段。应用骨髓切片免疫组织化学技术可以对骨髓细胞进行原位观察,通过对细胞特异性抗原的定性、定位和定量分析,了解骨髓组织和细胞的结构和变化,这对血液系统疾病尤其是血液系统肿瘤的诊断、鉴别诊断,以及血液肿瘤的分类、分型和预后的判断提供了有利的研究手段。

C. 常用免疫组织化学染色方法有哪些

常用免疫组织化学染色方法, LSAB法。(SP法)(Labelled streptavidim biotln) 1.切片脱蜡至水。 2.0.3%H2O2甲醇处理切片10-20分钟。 3.水洗。 4.抗原修复。 5.PBS洗3次,1分钟/次。 6.加入血清孵育10分钟。 7.摔去血清,加入一抗孵育30-60分钟。 8.PBS洗3次,每次2分钟。加入二抗,孵育20分钟。 9.PBS洗3次,每次2分钟。 10.加入SP复合物孵育20-30分钟。 11.PBS洗3次,每次2分钟。 12.DAB-H2O2孵育5-10分钟。 13.PBS洗,水洗。 14.Harris苏木素染核5-10分钟。 15.水洗,分化 ,蓝化,脱水,透明并封固。生物帮上面有的,去看看吧, http://www.bio1000.com/zt/disease/ 疾病机理,疾病研究。

D. 什么情况下要做免疫组织化学染色诊断

近年来,随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现,使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。在常规肿瘤病理诊断中,5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可,其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断时,准确率可达50%-75%。
免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:
⑴恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;
⑵确定转移性恶性肿瘤的原发部位;
⑶对某类肿瘤进行进一步的病理分型;
⑷软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的;
⑸发现微小转移灶,有助于临床治疗方案的确定,包括手术范围的确定。
⑹为临床提供治疗方案的选择。

E. 什么是免疫组化染色

免疫组化染色是一种检查方法,是可以辨别疾病预后情况的,现在的情况如果是是免疫组化预后良好,一般是不会恶变的,只要是积极治疗就可以的

F. 免疫组化染色MLH1(+)MSH2(+)PMS2(+)MSH6(+)是什么意思

MLH1(+)、MSH2(+)PMS2(+)、MSH6(+),即微卫星稳定型大肠癌,提示适合于含氟尿嘧啶类药物的化疗方案,并且分化差是高危因素之一。

免疫组化和特殊染色是病理检查中常用的检测方法,免疫组化全称是免疫组织化学染色,病理检查中最常用的是HE染色,使用非HE染色的检测方法都可以称为特殊染色。都是病理检查中对送检组织进行的处理方法,组织经过一系列的处理之后才能在显微镜下观察其有无病变,病变是什么等。

(6)免疫组织化学染色怎么检查扩展阅读:

免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体,单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。

G. 什么是免疫组化染色,它的原理和步骤是什么

是病理学诊断方法,尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。
免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:
(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;
(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位;
(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型;
(4)软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的;
(5)发现微小转移灶,有助于临床治疗方案的确定,包括手术范围的确定。
(6)为临床提供治疗方案的选择。

H. 常用免疫组织化学染色方法有哪些

常用免疫组织化学染色方法, LSAB法.(SP法)(Labelled streptavidim biotln) 1.切片脱蜡至水. 2.0.3%H2O2甲醇处理切片10-20分钟. 3.水洗. 4.抗原修复. 5.PBS洗3次,1分钟/次. 6.加入血清孵育10分钟. 7.摔去血清,加入一抗孵育30-60分钟. 8.PBS洗3次,每次2分钟.加入二抗,孵育20分钟. 9.PBS洗3次,每次2分钟. 10.加入SP复合物孵育20-30分钟. 11.PBS洗3次,每次2分钟. 12.DAB-H2O2孵育5-10分钟. 13.PBS洗,水洗. 14.Harris苏木素染核5-10分钟. 15.水洗,分化 ,蓝化,脱水,透明并封固.

I. 免疫组织化学染色法的检查过程

用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法,称荧光抗体法。用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法,称荧光抗原法。免疫荧光组织化学分直接法、间接法和补体法。一、直接法(1) 检查抗原方法这是最简便、快速的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成特异性荧光抗体,直接用于细胞或组织抗原的检查。此法特异性强,常用于肾穿刺,皮肤活检和病原体检查,其缺点是一种荧光抗体只能检查一种抗原,敏感性较差。(2)检查抗体方法将抗原标记上荧光素,用此荧光抗原与细胞或组织内相应抗体反应,而将抗体在原位检测出来。二、间接法(1)检查抗体(夹心法)方法此法是先用特异性抗原与细胞或组织内抗体反应,再用此抗原的特异性荧光抗体与结合在细胞内抗体上的抗原相结合,抗原夹在细胞抗体与荧光抗体之间,故称夹心法。(2)检查抗体方法用已知抗原细胞或组织切片,加上待检血清,如果血清含有切片中某种抗原的抗体,抗体结合在抗原上,再用间接荧光抗体(抗种属特异性IgG荧光抗体)与结合在抗原上的抗体反应,在荧光显微镜下可见抗原抗体反应部位呈现明亮的特异性荧光。此法是检验血清中自身抗体和多种病原体抗体的重要手段。(3)检查抗原法此法是直接法的重要改进,先用特异性抗体与细胞标本反应,随后用缓冲盐水洗去未与抗原结合的抗体,再用间接荧光抗体与结合在抗原上的抗体结合,形成抗原-抗体-荧光抗体的复合物。同直接法相比荧光亮度可增强3或4倍。此法除灵敏性高外,它只需要制备一种种属间接荧光抗体,可以适用于同一种属产生的多种第一抗体的标记显示,这是现在最广泛应用的技术。三、补体法(1)直接检查组织内免疫复合物方法用抗补体C3荧光抗体直接作用组织切片,与其中结合在抗原抗体复合物上的补体反应,而形成抗原-抗体-补体—抗补体荧光抗体复合物,在荧光显微镜下呈现阳性荧光的部位就是免疫复合物上补体存在处,此法常用于肾穿刺组织活检诊断等。(2)间接检查组织内抗原方法常将新鲜补体与第一抗体混合同时加在抗原标本切片上,经37℃孵育后,如发生抗原抗体反应,补体就结合在此复合物上,再用抗补体荧光抗体与结合的补体反应,形成抗原-抗体-补体—荧光抗体的复合物,此法优点是只需一种荧光抗体可适用于各种不同种属来源的第一抗体的检查。[1]四、双重免疫荧光组织化学标记方法在同一组织标本上需要同时检查两种抗原时要进行双重荧光染色,一般均采用直接法,将两种荧光抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,加在标本上孵育后,按直接法洗去未结合的荧光抗体,抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记,发黄绿色荧光;抗B抗体用TMRITC或RB200标记,发红色荧光,可以明确显示两种抗原的定位。

J. 免疫组织化学染色诊断是什么意思

指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在,此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测。

免疫组织化学的优势在于专一性、灵敏度、简便快速以及成本低廉,所以广为医院采用,通常是借由特定的肿瘤标记来筛选癌症。免疫组织化学染色法对基础研究及预防和诊疗上都是相当重要的一个方法。

(10)免疫组织化学染色怎么检查扩展阅读

应用的基本原则简述如下:

1、确定细胞类型和形态。组织细胞内有些蛋白具有组织特异性,如胶质原纤维酸性蛋白只存在于星形胶质细胞内,神经丝蛋白只存在于神经细胞内。通常把这些具有组织特异性的蛋白称为标记性蛋白。通过标记性蛋白的特异性抗体可确定细胞种类。

有些细胞在光镜下不易辨认,通过对胞质内的特定蛋白实施免疫组化染色,便能清楚显示此类细胞外形轮廓。这种作用在神经科学研究和肿瘤临床病理中显得尤为重要。

2、辨认细胞产物的来源。利用某些细胞产物为抗原,制备相应的抗体,对组织细胞实施免疫组织化学染色,以确定细胞产物的来源。如内分泌细胞产生的各种激素,大多数可用免疫组化染色技术辨认,据此可研究细胞的分泌功能及对内分泌肿瘤作功能分类,检测分泌异位激素的肿瘤等,了解细胞分化程度。

3、确定细胞的分化程度。不同的同一类细胞多表达不同的标志性蛋白,根据对这些不同蛋白的鉴定可确定细胞的分化程度。例如,神经上皮细胞的标志性蛋白是巢蛋白,当其分化为放射状胶质细胞时表达波形蛋白。

在神经元发生期分化为成神经细胞时则表达Ⅲβ神经微管蛋白,成神经细胞分化为成熟的神经元时表达神经丝蛋白。

4、追踪神经纤维束和它的投射区。用于此目的的免疫组织化学方法常与轴浆运输示踪法相结合来研究神经元之间的联系,轴浆运输示踪法是利用某些物质可被神经末梢摄取,经轴质逆行运输到胞体的特点,用组织化学方法显示出神经元的轮廓。常用示踪剂有辣根过氧化物酶和荧光金等。

5.在临床病理中的应用。如鉴定病变性质,发现微小病灶,探讨肿瘤起源或分化表型,确定肿瘤分期,指导治疗和预后。辅助疾病诊断和分类,寻找感染病因等。

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